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吡罗克酮乙醇胺盐通过PI3K/AKT通路破坏胶质瘤细胞的线粒体动力学
徐文琴; 叶静静; 王飞 ...
南方医科大学学报,
2023, Letnik:
43, Številka:
5
Journal Article
目的 探究吡罗克酮乙醇胺盐(PO)对胶质瘤细胞U251和U373增殖抑制和促凋亡的作用及其机制.方法 培养细胞,经不同浓度的PO处理,CCK-8法和EdU实验检测细胞增殖情况;克隆形成实验检测细胞克隆形成;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜电位水平;荧光探针检测线粒体形态学改变,Western ...
blot检测线粒体分裂蛋白DRP1和融合蛋白OPA1;转录组测序和差异基因富集分析后进行Western blot检测验证PI3K,AKT和p-AKT蛋白表达水平.结果 CCK-8结果显示,PO可以抑制U251和U373细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性(P<0.001);EdU实验显示,PO处理组的细胞增殖水平明显下降,克隆形成实验的细胞克隆数也明显减少(P<0.01);流式细胞术显示,PO处理组细胞凋亡率增加(P<0.05);荧光探针检测显示,线粒体膜电位水平下降并可致线粒体形态学改变;富集分析显示,下调的基因显著富集于PI3K/AKT通路;Western blot结果显示,PO下调PI3K,AKT和p-AKT蛋白表达水平(P<0.05).结论 PO通过PI3K/AKT通路干扰线粒体融合裂变功能,进而抑制胶质瘤细胞的增殖和增加凋亡.
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Celotno besedilo
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乳酸诱导PLEKHA4的上调参与胶质瘤细胞增殖和凋亡的生物学进程
叶静静; 徐文琴; 奚邦生 ...
南方医科大学学报,
2023, Letnik:
43, Številka:
7
Journal Article
目的 探究乳酸诱导的PLEKHA4基因表达对胶质瘤细胞的生物学功能的影响以及潜在分子机制.方法 通过GEO数据库以及GEPIA2在线网站分析PLEKHA4表达水平与胶质瘤病理分级的关系,通过RNA小干扰技术设计PLEKHA4 ...
siRNA后分别转染胶质瘤U251和T98G细胞处理1d,通过实时细胞分析技术以及Edu实验检测胶质瘤细胞的增殖能力,平板克隆实验检测细胞的克隆形成能力,流式分析技术检测胶质瘤细胞的周期和凋亡;PCR检测临床收集的胶质瘤样本和对照以及乳酸和葡萄糖治疗下胶质瘤细胞中PLEKHA4的mRNA表达量的变化;体内异种移植小鼠实验检测裸鼠成瘤能力;Western blot检测cyclinD1、CDK2、Bcl2、β-catenin表达和MAPK信号通路关键蛋白的磷酸化表达水平.结果 GEO数据库和在线网站分析结果显示PLEKHA4在胶质瘤组织中高表达且与不良预后相关;RTCA以及Edu实验显示,敲降PLEKHA4抑制胶质瘤细胞的增殖(P＜0.05);平板克隆实验显示,敲降组的细胞克隆数目明显低于对照组(P＜0.01);流式细胞术分析结果显示敲低PLEKHA4后细胞周期受到阻滞G1期细胞增加,S期细胞减少,凋亡细胞增加(P＜0.01);胶质瘤样本和乳酸和葡萄糖治疗后胶质瘤细胞的PLEKHA4基因的mRNA表达升高(P＜0.01);敲降PLEKHA4基因后,裸鼠成瘤能力降低;Western blot结果显示敲减PLEKHA4后能够抑制cyclinD1、CDK2、Bcl2等功能蛋白的表达,且显著抑制ERK、p38的磷酸化和β-catenin蛋白表达(P＜0.01).结论 敲减PLEKHA4基因通过抑制MAPK信号通路的活化和β-Catenin的表达,抑制胶质瘤细胞的增殖促进凋亡,同时糖酵解产生的乳酸诱导PLEKHA4表达上调.
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Celotno besedilo
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肝细胞癌中促癌miRNA调控网络分析与验证
叶静静; 徐文琴; 陈天兵
南方医科大学学报,
2022, Letnik:
42, Številka:
1
Journal Article
目的 构建肝细胞癌中生存相关的促癌miRNA与其靶基因的调控网络并对关键miRNA-靶基因进行实验验证.方法 ...
利用OncomiR和Oncolnc获取肝癌中生存相关的miRNA,并进行表达分析和生存分析;利用miRNet预测miRNA的靶基因,通过GEPIA2、Ualcan分别对靶基因进行生存和表达分析,通过Starbase进行miRNA-靶基因共表达分析,利用Cytoscape软件构建miRNA-靶基因网络,通过Enrichr进行靶基因富集分析,利用String数据库进行蛋白互作网络构建.将NC,hsa-miR-1226-3p的mimic或inhibitor,hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞,利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况,另取转染后48 h样品利用Q-PCR检测靶基因表达情况;将NC,hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞,48 h后用Werstern blot检测靶基因蛋白表达情况;将NC+p-GCDH-WT质粒,NC+p-GCDH-MUT质粒,hsa-miR-221-5p mimic+p-GCDH-WT质粒,hsa-miR-221-5p mimic+p-GCDH-MUT质粒分别转染HepG2细胞,48 h后利用多功能酶标仪检测荧光素酶活性;将NC,hsa-miR-221-5p mimic,pEGFP N1-GCDH质粒,hsa-miR-221-5p mimic+pEGFP N1-GCDH质粒分别转染HepG2细胞,利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况,transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力.结果 从OncomiR和Oncolnc数据库中分别得到223个(P<0.05)和146个(P<0.05)在肝癌中与生存相关的miRNA,两者交集为131个;结合表达分析和生存分析的结果共鉴定出48个促癌miRNA;miRnet共预测出10278个靶基因,通过生存和表达分析符合预期的为44个,miRNA-mRNA共表达分析后的结果显示27个靶基因符合预期.通过Cytoscape软件构建的miRNA-靶基因网络包含了25个促癌miRNA和27个抑癌基因.富集分析结果显示靶基因集中作用于脂肪酸代谢通路.验证实验显示,转染hsa-miR-1226-3p的mimic和inhibitor,hsa-miR-221-5p的m
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Celotno besedilo
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预应变和热处理对AZ31镁合金形变行为的影响（英文）
陈红兵 刘天模 卢立伟 何杰军 翟彦博
中国有色金属学报：英文版,
2015
11
Journal Article
Recenzirano
对挤压态AZ31镁合金进行预压缩和热处理,研究预压缩和热处理对其形变行为的影响。结果表明:在低温下退火(170℃退火4 h),试样经过退火处理或未经退火处理的几乎具有相等的屈服强度(~148 MPa),这是由于它们的显微组织几乎没有变化。然而在相同退火条件下,经预压缩并退火的试样的屈服强度(~225 MPa)高于只有预压缩试样的屈服强度(~200 ...
MPa)。由于溶质原子在孪晶界偏析引起强化,前者显示出退火硬化效应。预压缩试样在400℃退火1h后,其伸长率(~28%)高于预压缩试样的伸长率(~15%),但其屈服强度(~125 MPa)低于预压缩试样的屈服强度(~200 MPa)。
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Celotno besedilo
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